甲醇哪家好？彪仕奇告訴您實驗里常用的乙腈和甲醇在色譜分析中的區(qū)別，乙腈(ACN)和甲醇(MeOH)是在反向色譜柱方法開發(fā)中廣泛使用的兩種常見溶劑。所以，除了知道乙腈比甲醇有更高的洗脫能力這一事實外，色譜分析人員還應(yīng)該知道其他的特性嗎?讓我們來討論一些所有色譜專家都應(yīng)該知道的問題。
紫外線吸光度
對于HPLC級溶劑(我們在HPLC分析中應(yīng)始終使用HPLC級溶液)，乙腈的吸光度在這兩種溶劑中最低，非常適合低紫外光分析。甲醇在205-210nm左右有較高的紫外光吸收值，在非常低的紫外光范圍內(nèi)略有限制。
溶劑溶解性
乙腈和甲醇在溶解多種緩沖鹽和樣品的能力上存在顯著差異。這些差異在方法開發(fā)中至關(guān)重要。
1.流動相溶解度
梯度運行顯示低重現(xiàn)性或失敗的一個常見原因可能與運行高濃度緩沖液和高濃度有機溶液有關(guān)。而含有濃度小于10mM鹽溶液的水溶液/有機溶液在大多數(shù)梯度條件下不太可能沉淀（最多98%是有機溶劑，而不是100%)，大多數(shù)與高效液相色譜應(yīng)用一起使用的緩沖溶液會有更高的鹽濃度，當(dāng)分析條件中有機溶劑含量較高時可能會從溶液中析出（導(dǎo)致堵塞，泄漏，插頭和不準(zhǔn)確的結(jié)果）。在反向色譜法中選擇有機組成時要謹(jǐn)慎。確保使用的溶液在所有濃度下都是穩(wěn)定的。還要驗證緩沖能力是否仍然存在，當(dāng)使用高有機濃度時(當(dāng)緩沖液被稀釋時)。
甲醇總體上具有更好的溶解度特性(優(yōu)于乙腈)，這意味著它在較高濃度下能更好地溶解大多數(shù)鹽，從而獲得更好的性能和更少的沉淀。
2.樣品的溶解度(對峰形和保留的影響)
液相色譜的一個基本要求是樣品完全溶解在流動相(初始流動相)中。在分析前，將樣品溶解在流動相或強度稍弱的溶液（不是更強的溶液）。這確保它將作為一個集中的段塞加載到柱的頂部，以改善峰形和RSD。如果樣品沒有完全溶解在流動相，那么你實際上并沒有分析整個樣品。甲醇優(yōu)于乙腈的另一個方面是它能完全溶解更多類型的樣品。這一改進(jìn)的溶解度可能導(dǎo)致更好的整體峰形。甲醇的選擇性也不同于乙腈(不僅僅是洗脫強度)，這可能導(dǎo)致峰洗脫時間與預(yù)期的保留時間不同。這也是為什么在開發(fā)反向方法時，我們總是嘗試使用含有乙腈或甲醇的不同流動相混合物的另一個原因。
背壓
乙腈的粘性比甲醇小，因此通常會導(dǎo)致整體柱壓和系統(tǒng)背壓降低。乙腈和水的混合物也會發(fā)生吸熱反應(yīng)(冷卻溶液)，從而在溶液中捕獲氣體。如果你預(yù)先混合你的流動相，讓它靜置幾分鐘后在制備。
希望這篇關(guān)于這兩種常用高效液相色譜溶劑的差異的簡短討論將有助于您開發(fā)出更好的高效液相色譜和LC-MS方法。
