在層析技術(shù)發(fā)展之初，對(duì)于一些物質(zhì)的分離方式都處在比較原始的狀態(tài)，并且分離的結(jié)果也并不是很理想。
bio-rad專(zhuān)家談到層析技術(shù)最初是在1903~1906年由俄國(guó)植物學(xué)家M.Tswett首先提出來(lái)的。
那時(shí)，他將葉綠素的石油醚溶液倒入碳酸鈣管柱，并繼續(xù)以石油醚淋洗，由于碳酸鈣對(duì)葉綠素中各種色素的吸附能力不同，所以色素被逐漸分離，在管柱中出現(xiàn)了不同的色譜圖。于是就稱(chēng)這種混合物的分離方法為，有色的圖譜法（Chromato+graphy），簡(jiǎn)稱(chēng)色譜法，又叫層析法。不過(guò)，當(dāng)時(shí)這種方法并未引起人們的注意。
接下來(lái)隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展以及生產(chǎn)實(shí)踐的需要，層析技術(shù)也得到了迅速的發(fā)展。這里就不得不提到兩位在層析技術(shù)發(fā)展史上做出重要貢獻(xiàn)的人，他們是英國(guó)生物學(xué)家馬?。?/span>Martin）和辛格（Synge）。是他們首先提出了色譜塔板理論。
色譜塔板理論其實(shí)是基于熱力學(xué)近似的理論，這個(gè)理論中涉及的對(duì)象有目標(biāo)分離物，色譜柱。這里色譜柱好比是一個(gè)分餾塔。理論是這樣的：將目標(biāo)分離物倒入“分餾塔”，這樣就會(huì)在分餾塔板間移動(dòng)，在每一個(gè)塔板內(nèi)組分分子在固定相和流動(dòng)相之間形成平衡，隨著流動(dòng)相的流動(dòng)，組分分子不斷從一個(gè)塔板移動(dòng)到下一個(gè)塔板，并不斷形成新的平衡。一個(gè)色譜柱的塔板數(shù)越多，則其分離效果也就越好。這個(gè)分離過(guò)程提升分離效率，并且定量的進(jìn)行描述，分析這個(gè)分離過(guò)程。
這是個(gè)進(jìn)步，并且馬?。?/span>Martin）和欣革（Synge）還提出更為遠(yuǎn)見(jiàn)卓識(shí)的預(yù)言：1、流動(dòng)相可用氣體代替液體，因?yàn)榕c液體相比，分離時(shí)候，物質(zhì)間作用力更小，對(duì)分離也就更有好處。2、若能夠使用非常細(xì)的顆粒填料，并在色譜柱兩端施加較大的壓差，從而增加了理論培板數(shù)，這將會(huì)大大提高分離效率。
發(fā)展期
上世紀(jì)60、70年代是色譜/層析技術(shù)快速發(fā)展的時(shí)代，首先是層析介質(zhì)有了飛速的發(fā)展，各種人工合成的介質(zhì)出現(xiàn)，如硅膠、聚苯乙烯二乙烯基樹(shù)脂、瓊脂糖、葡聚糖、聚丙烯酰胺等樹(shù)脂或凝膠的出現(xiàn)，極大地拓展了層析技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域和范圍，基于不同介質(zhì)的層析方法也如雨后春筍般不斷涌現(xiàn)。
